近年來,隨著酶底物法檢測(cè)總大腸、大腸埃希氏菌、糞(耐熱)大腸菌群的實(shí)驗(yàn)方法逐漸被普及。酶底物檢測(cè)方法需要配合程控定量封口機(jī)使用,其中在實(shí)驗(yàn)過程中使用到的51孔定量培養(yǎng)過待測(cè)大腸菌群水樣后,需要對(duì)照相應(yīng)的MPN表來查看得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
那么,對(duì)于初次使用酶底物法檢測(cè)儀器的實(shí)驗(yàn)人員來說,猛的一看MPN表可能會(huì)覺得數(shù)字那么多,不知道該如何查看,接下來小編就來教大家怎么查看酶底物法51孔97孔定量盤MPN表。
酶底物法檢測(cè)方法采用大腸桿菌產(chǎn)生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色。大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-glucuronide)使培養(yǎng)液在波長366 nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來定性定量水中總大腸菌群、糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)及大腸埃希氏菌。
該方法操作簡便、實(shí)驗(yàn)周期短并且對(duì)實(shí)驗(yàn)人員要求也不高,實(shí)驗(yàn)人員在檢測(cè)大腸菌群實(shí)驗(yàn)過程中,由于定量盤內(nèi)添加有大腸菌群檢測(cè)試劑,將檢測(cè)盤從培養(yǎng)箱中取出后,如果孔格不顯色,就說明檢測(cè)結(jié)果為陰性;如果孔格顯示黃色,則說明總大腸菌群檢測(cè)結(jié)果為陽性;另外,如果孔格顯示黃色并且在紫外分析儀下顯熒光,則說明大腸埃希氏菌群檢測(cè)結(jié)果為陽性,我們就需要計(jì)算陽性孔格數(shù)。
其實(shí),我們?cè)趯?duì)照酶底物法檢測(cè)大腸菌群MPN表的查看方法非常簡單。在我們計(jì)算完定量盤上的陽性孔格數(shù)后,51孔定量盤直接按照孔格數(shù)對(duì)照表即可得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果;97孔定量盤需要分別計(jì)算陽性大、小孔格數(shù),然后在二維表格中查找對(duì)照即可得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
一般其概況下,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的單位是以MPN/100ml,即cfu/ml,該數(shù)值就代表了大腸菌群的濃度。51孔定量盤的檢測(cè)范圍是0-200MPN,97孔定量盤的檢測(cè)范圍是0-2419MPN。下面我們就舉例說明:比如在51孔格定量盤中查有13個(gè)孔格數(shù)顯色為黃色,而在紫外分析儀下無熒光色孔格,在查表可得出,該水樣總大腸菌群濃度值為15.0MPN/100ml。97孔定量盤檢測(cè)也是同樣的道理即可得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
51孔定量盤使用MPN表
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97孔定量盤使用MPN表
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97孔定量盤MPN表2
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以上就是關(guān)于如何查看酶底物法檢測(cè)大腸菌群實(shí)驗(yàn)結(jié)果的方法,通過以上內(nèi)容我們可以看出,酶底物法相較于傳統(tǒng)的濾膜法、多管發(fā)酵法,無論是從實(shí)驗(yàn)過程還是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定都比較省時(shí)省力,而且誤差較小,小編也在此建議有條件的實(shí)驗(yàn)室可以嘗試采用酶底物法進(jìn)行水中大腸菌群的測(cè)定。